【摘 要】
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目的 探讨咪喹莫特诱导Raw264.7巨噬细胞自噬和死亡的发生及丹皮酚的干预保护作用.方法 将Raw264.7巨噬细胞分为5组:正常组、模型组和低、中、高3个剂量实验组.正常组加DMEM
【机 构】
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南京中医药大学药学院,江苏南京,210023
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目的 探讨咪喹莫特诱导Raw264.7巨噬细胞自噬和死亡的发生及丹皮酚的干预保护作用.方法 将Raw264.7巨噬细胞分为5组:正常组、模型组和低、中、高3个剂量实验组.正常组加DMEM培养液;模型组用终浓度为10μg·mL-咪喹莫特处理RAW264.7巨噬细胞24 h;低、中、高3个剂量实验组分别用终浓度为1,10,100 μmol·L-的丹皮酚预先加入2h后,再加入10μg·mL-咪喹莫特处理24 h.用CCK8法检测细胞存活率,以蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3-I(LC3-I)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、自噬相关蛋白5(ATG5)]的表达.结果 空白组、模型组和低、中、高3个剂量实验组的细胞存活率分别为(100.00±0.04)％,(38.68 ±0.03)％,(47.02 ±0.06)％,(80.48 ±0.06)％和(54.12±0.04)％;模型组与空白组相比或者低、中、高剂量3个实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P ＜0.05),其中中剂量实验组效果最佳.空白组、模型组和中剂量实验组的LC3Ⅱ/LC3 I的比值分别为0.88±0.15,1.27±0.04和0.97±0.03;这3组的ATG5的相对表达量分别为0.65±0.02,0.95±0.02和0.46-±0.06;模型组与正常组相比,差异均有统计学意义(均P＜0.05);中剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).结论 丹皮酚对咪喹莫特诱导的RAW264.7巨噬细胞自噬和死亡具有保护作用.
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