黑松过氧化物酶cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达

来源 :青岛大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yueliangjing
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采用RT—PCR的方法,从黑松愈伤组织中获得过氧化物酶cDNA,其开放阅读框全长981bp,编码326个氨基酸残基。将该开放读框克隆到表达载体pET-15,构建重组表达质粒pET—15b—POD,转化E.coliBL21(DE3)构建工程菌,IPTG诱导工程菌高效表达过氧化物酶,通过Ni2+螯合亲和层析得到了电泳纯的重组过氧化物酶。生物信息学分析表明,该蛋白具有植物过氧化物酶的典型结构,以及具有过氧化物酶家族保守的活性位点。活性分析表明该蛋白的确是黑松过氧化物酶,这一结果为松萎蔫病抗性机理的研究奠定了基础
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