牛类胚胎干细胞的分离与克隆

来源 :中国农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：libing09006

【摘要】

：

选用荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎,以PMOL/LEF细胞为饲养层,以DMEM+15ml/100ml NBS+0.1μmol/INa 2SeO3+0.1mmo1/L β-巯基乙醇+10ng/ml IGF+1000 IU/ml LIF为培养液,用消化法(ICM

【作者】

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安立龙杨奇冯秀亮杨春荣雷安民高志民窦

【机构】

：

西北农林科技大学

【出处】

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中国农业科学

【发表日期】

：

2001年5期

【关键词】

：

牛小鼠胚胎干细胞内细胞团分离克隆

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目 ( 39670 35 9)

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选用荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎,以PMOL/LEF细胞为饲养层,以DMEM+15ml/100ml NBS+0.1μmol/INa 2SeO3+0.1mmo1/L β-巯基乙醇+10ng/ml IGF+1000 IU/ml LIF为培养液,用消化法(ICM用0.25g/100ml胰蛋白酶+0.04 g/100ml EDTA),ES细胞集落用(0.125 g/100ml胰蛋白酶+0.02 g/100ml EDTA)和机械剥离法离散ICM细胞集落和隆起明显的ES细胞集落为细胞小块,获得了9个传至6代的牛类ES细胞系

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