【摘 要】
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目的利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导培养建立及鉴定3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型,探讨紫色悬钩子提取物对胰岛素抵抗的影响。方法采用3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、地塞米松(Dex)、胰岛素联合诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞,分别与0,2,5,10,15,20ng·mL-1TNF-α共孵育24,48,72,96h;MTT法检测紫色悬钩子提取物和TNF-α对3T3-L
【基金项目】
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青海省自然科学基金资助项目(2020-ZJC-942Q);
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目的利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导培养建立及鉴定3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型,探讨紫色悬钩子提取物对胰岛素抵抗的影响。方法采用3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、地塞米松(Dex)、胰岛素联合诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞,分别与0,2,5,10,15,20ng·mL-1TNF-α共孵育24,48,72,96h;MTT法检测紫色悬钩子提取物和TNF-α对3T3-L1脂肪细胞活力的影响;油红O染色观察细胞形态的变化;WesternBlot检测Akt、p-Akt蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞对2-NBDG的摄取。结果TNF-α浓度大于等于10ng·mL-1,诱导时间大于等于72h能够显著降低胰岛素刺激后p-Akt的表达(P<0.01),产生胰岛素抵抗;胰岛素刺激后,与模型组相比,紫色悬钩子提取物都能够不同程度提高细胞中p-Akt的表达和对2-NBDG的摄取能力,其中Fr.3作用最显著(P<0.05)。结论 TNF-α诱导培养可以成功建立胰岛素抵抗细胞模型,紫色悬钩子提取物具有改善胰岛素抵抗的作用。
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