【摘 要】
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[目的]建立一种淋球菌核酸的快速检测方法,并对该方法的灵敏度 、特异性以及与荧光定量PCR方法的检测结果一致性进行初步评价.[方法]使用重组酶聚合酶扩增-侧流层析分析(RPA-
【机 构】
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复旦大学生命科学学院 ,上海 200082;常州市疾病预防控制中心 ,江苏 常州 213022
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[目的]建立一种淋球菌核酸的快速检测方法,并对该方法的灵敏度 、特异性以及与荧光定量PCR方法的检测结果一致性进行初步评价.[方法]使用重组酶聚合酶扩增-侧流层析分析(RPA-LFA)技术建立淋球菌核酸快速检测方法.使用淋球菌核酸检测国家参考品对该方法的分析灵敏度与分析特异性进行评价;使用已上市的淋球菌核酸检测荧光定量PCR法试剂盒 、RPA-LFA法分别对临床采集的61份生殖道分泌物样本进行检测,对检测结果进行一致性评价.[结果]RPA-LFA法的分析灵敏度为104 cells/mL;分析特异性良好,对10株不同淋球菌菌株均可测出,对10株非淋球菌菌株均不能测出;RPA-LFA法与荧光定量PCR方法检测一致性高(Kap-pa=0.97),RPA-LFA法的阳性检出率为52.5％(32/61)与荧光定量PCR法的阳性检出率54.1％(33/61)相比较差异无显著性(P>0.05);以荧光定量PCR方法为参比,RPA-LFA方法检测灵敏度为96.97％,检测特异性为100.00％;单个样本实时荧光定量PCR方法流程时间为120±20min,明显长于RPA-LFA的(35±5)min,且两者比较差异有显著性(P<0.05).[结论]成功建立了RPA-LFA淋球菌核酸快速检测方法,该方法与荧光定量PCR法检测结果一致性高,且不需要复杂精密的温控设备,检测结果判读简单,缩短了淋球菌核酸检测的时间,降低了成本.
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