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目的探讨无血清三维条件培养结合抗癌药物分离及鉴定人骨肉瘤肿瘤干细胞的可行性。方法将来源于人体的骨肉瘤细胞种植于1．2％藻酸盐凝胶中，并置于添加有阿霉素（Epirubicin，0．8μg／ml）的无血清DMEM／F12条件培养基中培养。培养7～10天后，可见凝胶内出现由单细胞增殖形成的单克隆球。取出该单克隆球，并通过细胞免疫荧光（Oct3／4和Nanog）、体内致瘤实验，检测该单克隆球细胞的生物特性。结果单克隆球主要由Oct3／4和Nanog阳性细胞组成，这些阳性细胞具有明显的致瘤作用：结论分离所得的单克隆