抗肝癌单链抗体融合PE38重组免疫毒素的构建、表达及纯化

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：aaronfly08

【摘要】

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目的: 构建绿脓杆菌外毒素PE38融合人源化鼠抗肝癌单链抗体(hscFv)原核表达载体,并对其产物作初步纯化,检测其对人肝癌细胞系SMMC 7721的毒性作用. 方法: 采用基因工程原理,

【作者】

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赵强子刘彦仿窦科峰张静李开宗

【机构】

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第四军医大学,第四军医大学

【出处】

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第四军医大学学报

【发表日期】

：

2003年9期

【关键词】

：

PE38 免疫毒素癌肝细胞表达纯化 PE38 immunotoxins hepatocelluarcarcinoma expression pur

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目的: 构建绿脓杆菌外毒素PE38融合人源化鼠抗肝癌单链抗体(hscFv)原核表达载体,并对其产物作初步纯化,检测其对人肝癌细胞系SMMC 7721的毒性作用. 方法: 采用基因工程原理,将PE38基因片段亚克隆入hscFv表达载体pGEX-4T-1中,重组克隆载体经酶切及DNA序列测定证实两片段连接正确;转化大肠杆菌JM109后,受IPTG诱导表达GST融合蛋白,产物包涵体经变性、复性及重折叠并经 GST 亲合层析柱层析、凝血酶消化后,得到纯化的hscFv-PE38融合蛋白.采用 MTT 法检测hscF

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