双向凝胶电泳银染蛋白质点的肽质谱指纹图分析

来源 :生物化学与生物物理学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:scfeiyang
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对双向凝胶电泳后银染显色的蛋白质点经脱色与原位还原和烷基化处理后 ,用TPCK 胰蛋白酶进行酶解 ,采用带有C18反相载体的ZipTipTM吸头进行脱盐处理 ,再进行MALDI TOF肽质谱指纹图分析 ,然后将肽质谱分析数据在EMBL数据库中进行搜寻从而对蛋白质点进行鉴定。结果表明用该实验程序可对银染显色的单一蛋白质点进行快速肽质谱指纹图分析 ,ZipTipTM的应用可以明显增加质谱分析的信噪比 ,提高分析灵敏度。用以上方法对虎纹捕鸟蛛粗毒双向电泳图谱的部分蛋白质点进行了鉴定。
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