芦荟多糖和芦荟苷对黄曲霉毒素B1致大鼠脾损伤的干预作用

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黄曲霉毒素B1(AFB1)是人类I类致癌物,能够导致机体免疫器官损伤从而引起免疫抑制,而免疫抑制往往与癌症的发生密切相关。芦荟是一种传统药食两用植物,在抗氧化、免疫调节和抗肿瘤等方面具有显著功效,但是其拮抗AFB1致脾损伤的研究尚未被报道。本论文旨在探讨芦荟中两种活性成分,芦荟多糖(AP)和芦荟苷对亚慢性AFB1致大鼠脾损伤的干预作用,这为预防AFB1中毒具有积极意义,同时对芦荟产业的发展也具有潜在价值。64只雄性wistar大鼠(5周龄)适应性喂养一周(第0周),根据体重分为8组:空白组;糖空组(60 mg·kg-1·bw·d-1 AP);苷空组(30 mg·kg-1·bw·d-1芦荟苷);AFB1模型组(200μg·kg-1·bw·d-1 AFB1);低糖组(20 mg·kg-1·bw·d-1 AP);高糖组(60 mg·kg-1·bw·d-1 AP);低苷组(10 mg·kg-1·bw·d-1芦荟苷);高苷组(30 mg·kg-1·bw·d-1芦荟苷)。实验第1~2周,所有大鼠根据体重每天灌胃适量的溶剂水(空白组和模型组)和相应剂量的干预药物。第3~7周,模型组和干预组大鼠每天灌胃以200μg·kg-1·bw剂量的AFB1(溶于玉米油),其余三组灌胃等体积的玉米油,1 h后,所有组大鼠按照1~2周的操作继续灌胃一次。观察大鼠生长状况、测定免疫功能相关指标评定AP和芦荟苷对亚慢性AFB1致大鼠脾损伤时的干预作用,并从脾脏氧化应激和细胞凋亡状态探讨其可能的作用机制。结果显示:(1)亚慢性AFB1暴露引起大鼠精神萎靡、日均摄食量下降、体重增长缓慢,而AP和芦荟苷的干预能够显著改善大鼠生长状况,摄食量增多,体重提高。(2)亚慢性AFB1暴露导致大鼠脾损伤,而AP和芦荟苷能够提高大鼠免疫器官指数,抑制脾脏组织病变,通过提高CD3+、CD4+T淋巴细胞比例,降低CD8+T淋巴细胞比例,升高CD4+/CD8+比值调节T淋巴细胞亚群,AP通过抑制炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ表达,芦荟苷通过抑制IL-1β、IL-6和IFN-γ表达,从而改善AFB1中毒大鼠的免疫功能。(3)机理探究发现,AFB1暴露使大鼠脾脏和血浆中ROS含量显著提高,脾脏中MDA含量上升,CAT、GSH、GSH-PX、SOD活性下降,线粒体膜电位水平明显下降,但是AP和芦荟苷的干预可以显著改善AFB1中毒大鼠的氧化应激状态。(4)流式细胞术和RT-PCR结果显示,AFB1暴露通过上调Bax和caspase-3 m RNA表达、下调Bcl-2 m RNA表达和Bcl-2/Bax比率激活线粒体途径导致大鼠脾脏细胞凋亡,而AP和芦荟苷干预对这一结果有明显改善作用。因此,AP和芦荟苷对AFB1导致大鼠脾损伤具有显著的预防作用,可能与其良好的抗氧化能力和凋亡调控能力有关,这为芦荟的开发利用提供了理论指导。
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