论文部分内容阅读
目的:观察反义hTERT表达质粒转染K562细胞后是否能够抑制端粒酶活性及K562细胞的增生.方法:质粒的构建与转染:将290 bp hTERT cDNA片段,反向连接于pLNCX-neo质粒上得到反义hTERT基因表达质粒.在体外转染中通过脂质体法将质粒导入K562细胞中,以G418进行筛选得到阳性克隆;以MTT法和形态学法检测反义hTERT表达质粒对K562细胞增生的抑制作用;以TRAP-PCR ELISA法来研究反义hTERT基因对K562细胞的端粒酶活性的抑制作用.结果:转染反义hTERT表达质粒组与对照组(空白对照及空质粒组)相比较,生长速率明显变慢,部分细胞出现凋亡等形态学改变.反义hTERT对K562细胞的端粒酶活性具有明显的抑制作用.结论:研究构建的端粒酶反义hTERT基因表达质粒转染到K562细胞中后,能够封闭K562细胞hTERT-mRNA的表达,在抑制端粒酶活性的同时,减慢了K562细胞的生长速度.