重组人磷脂酰肌醇3—激酶p110β催化亚基的原核表达

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目的:表达人磷脂酰肌醇3-激酶 p110 β催化亚基.方法:将构建有人磷脂酰肌醇3 -激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI 3-K)p110 β催化亚基cDNA的重组质粒,转化大肠杆菌BL 21(DE3),用IPTG进行诱导表达.用磷脂酰肌醇-4、5-二磷酸、[γ-32P]ATP与重组PI 3-K p110 β催化亚基一起保温的方法测定PI 3-K的活性;32P标记的磷脂用氯仿和甲醇抽提、板薄层层析和放射自显影来分析.结果:SDS-PAGE显示表达出一110 kD的新蛋白
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