【摘 要】
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以牡丹(Paeonia suffruticosa)花瓣为材料,根据课题组前期得到的一条花衰老相关基因的表达序列标签,通过RACE-PCR技术成功获得MADS-box转录因子家族中的PsMADS4基因的全长cDN
【机 构】
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青岛农业大学生命科学学院,山东省高校植物生物技术重点实验室,山东青岛266109
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以牡丹(Paeonia suffruticosa)花瓣为材料,根据课题组前期得到的一条花衰老相关基因的表达序列标签,通过RACE-PCR技术成功获得MADS-box转录因子家族中的PsMADS4基因的全长cDNA序列,并对其进行了生物信息学分析.采用实时定量PCR技术对PsMADS4基因进行了时空表达分析,构建了Ps-rnMADS4超表达载体.结果表明,PsMADS4的cDNA全长1081 bp,开放阅读框长738 bp,编码245个氨基酸;该蛋白的分子量为28.23 kDa,等电点为8.513,为疏水性蛋白;表达分析结果显示,PsMADS4在不同组织中的表达水平不同,在花瓣中的表达量最高,且在盛花期花瓣中的表达量较高;对pBI121-PsMADS4重组质粒分别进行PCR鉴定和双酶切鉴定,结果显示PsMADS4基因已经插入植物表达载体pBI121中,表明Ps-MADS4的过表达载体构建成功.研究结果拟对进一步研究PsMADS4在牡丹花发育中的功能提供理论依据,为延缓牡丹花衰老提供候选基因.
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