【摘 要】
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目的观察CXC趋化因子配体14(CXCL14)在结肠癌组织中的表达,并探讨其对结肠癌细胞增殖及细胞周期的影响。方法采用免疫组织化学法分析40例结肠癌及癌旁组织CXCL14蛋白的表达水平;构建含人CXCL14全长序列的p Lenti6. 3_CXCL14_IRES2-EGFP重组质粒与包装质粒共转染293T细胞,制备表达CXCL14的慢病毒,转染HT29结肠癌细胞;通过Western blot检测转
【机 构】
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325035温州市中心医院肿瘤外科,台州市第一人民医院普外科,台州市第一人民医院普外科,温州医科大学附属第一医院胃肠外科,温州医科大学基础医学实验中心
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目的观察CXC趋化因子配体14(CXCL14)在结肠癌组织中的表达,并探讨其对结肠癌细胞增殖及细胞周期的影响。
方法采用免疫组织化学法分析40例结肠癌及癌旁组织CXCL14蛋白的表达水平;构建含人CXCL14全长序列的p Lenti6. 3_CXCL14_IRES2-EGFP重组质粒与包装质粒共转染293T细胞,制备表达CXCL14的慢病毒,转染HT29结肠癌细胞;通过Western blot检测转染后HT29结肠癌细胞中CXCL14的蛋白表达,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测其对结肠癌细胞增殖能力的影响,最后采用流式细胞技术检测CXCL14干预后细胞周期分布的改变。
结果在结肠癌组织中,CXCL14蛋白表达较癌旁组织显著降低(P< 0.01),其平均吸光度值分别为0.541 1和0.176 9,且其表达水平随着肿瘤分化程度降低而减少(P< 0.05)。CXCL14慢病毒转染的HT29结肠癌细胞能明显上调CXCL14表达。CCK-8细胞增殖试验显示,CXCL14慢病毒转染的HT29结肠癌细胞活力明显受到抑制(P< 0.01)。细胞周期分析显示,CXCL14干预组在G1期的细胞百分数[(67.46±0.92)%]显著低于对照组[(82.34±0.75)%,P<0.05],S期的细胞百分数[(36.47±0.59)%]显著高于对照组[(21.97±0.64)%,P< 0.05]。
结论结肠癌中的CXCL14可直接作为一个潜在的抑制基因参与结肠癌发生、发展过程。
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