【摘 要】
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目的:观察丹参注射液对肿瘤细胞与血小板相互作用诱导的卵巢癌细胞增殖的抑制作用.方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法和集落形成法,观察血小板对SKOV3体外生长的诱导作用及丹参注射液(12,24,48 g·L-1)的抑制作用;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血小板-肿瘤细胞相互作用系统及血小板上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)含量,并观察丹参注射液对TGF-β1分泌的影响;采用微量板法和ELISA观察肿瘤细胞培养上清液对血小板聚集和分泌的影响,并检测丹参注射液的抑制作用;采用蛋白免疫印迹法(We
【机 构】
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江西中医药大学药学院,南昌330004;江西中医药大学国际教育学院,南昌330004;江西中医药大学生命科学学院,南昌330004;首都医科大学基础医学院,北京100069
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目的:观察丹参注射液对肿瘤细胞与血小板相互作用诱导的卵巢癌细胞增殖的抑制作用.方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法和集落形成法,观察血小板对SKOV3体外生长的诱导作用及丹参注射液(12,24,48 g·L-1)的抑制作用;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血小板-肿瘤细胞相互作用系统及血小板上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)含量,并观察丹参注射液对TGF-β1分泌的影响;采用微量板法和ELISA观察肿瘤细胞培养上清液对血小板聚集和分泌的影响,并检测丹参注射液的抑制作用;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)观察丹参注射液对血小板核转录因子-κB (NF-κB)信号转导通路的影响及单独用丹参注射液的影响.结果:与空白组比较,血小板诱导组吸光度A570显著升高(P＜0.01);血小板+丹参注射液组A570则较血小板诱导组显著降低(P＜0.01),且与丹参注射液组比较,经血小板诱导的同剂量丹参注射液组细胞增殖抑制率更显著(P＜0.01).与空白组比较,血小板诱导组集落数明显增加(P＜0.05);血小板+丹参注射液的集落数则明显低于血小板诱导组(P＜0.05,P＜0.01).与空白组比较,血小板诱导组上清液中TGF-β1含量显著升高(P＜0.01);血小板+丹参注射液组TGF-β1含量显著降低(P＜0.01);与丹参注射液(24 g·L-1)组比较,经血小板诱导的同剂量丹参注射液组抑制率更高(P＜0.01).与空白组比较,经丹参注射液处理的血小板上清中TGF-β1明显减少(P＜0.05,P＜0.01);经丹参注射液处理的SKOV3上清中TGF-的含量差异无统计学意义.与空白组比较,SKOV3细胞上清液诱导组的血小板聚集、血栓素A2(TXB2)和5-羟色胺(5-HT)分泌显著升高(P＜0.01),细胞上清液诱导+丹参注射液组上述指标均显著降低(P＜0.01),且与丹参注射液(24 g·L-1)组比较,经细胞上清液诱导的同剂量丹参注射液组抑制率更高(P＜0.01).与空白组比较,血小板诱导组的磷酸化TGF-β激活激酶1(p-TAK1),p-NF-κB表达显著升高,p-NF-κB抑制蛋白(p-IκB)表达显著降低(P＜0.01);血小板+丹参注射液组p-TAK1,p-NF-κB表达均显著降低,p-IκB表达显著升高(P＜0.01).结论:丹参注射液可通过抑制血小板与肿瘤细胞相互作用从而对SKOV3细胞增殖产生的影响,其作用机制可能与抑制血小板分泌TGF-β1有关.
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