【摘 要】
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目的 研究经肝细胞生长因子(HGF)及骨髓间充质干细胞(MSCs)联合移植治疗慢性缺血性心脏病的疗效.方法 采集香猪髂骨骨髓,用密度梯度法和贴壁分离法相结合的方法分离、培养MSC
【机 构】
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福建医科大学福总临床医学院心胸外科,南京军区福州总医院心胸外科,第二军医大学长海医院心胸外科
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目的 研究经肝细胞生长因子(HGF)及骨髓间充质干细胞(MSCs)联合移植治疗慢性缺血性心脏病的疗效.方法 采集香猪髂骨骨髓,用密度梯度法和贴壁分离法相结合的方法分离、培养MSCs,通过细胞表面标记(CD34、CD44、CD71、Ⅷ因子和desmin)成份鉴定;HGF基因的重组腺病毒(AdHGF)+ MSCs共培养并检验HGF对MSCs生物学特征的影响.经左胸冠状动脉回旋支放置Ameroid环建立慢性心肌缺血香猪模型,将40只小型香猪采用随机对照分为5组(n=8),于缺血心肌处分别注射5×106/ml MSCs+ 4× 109 pfu 200μl AdHGF (MSCs+AdHGF组)、4×109 pfu 200μlAdHGF(AdHGF组)、5×106/ml MSCs 200μl(MSCs组),4×109 pfu 200μl AdNull(AdNull组)和生理盐水1 ml(对照组).治疗4周后行心脏超声心动图,数字减影动脉造影(DSA),单光子发射计算机体层摄影(SPECT)心肌灌注检查及心肌凋亡细胞等检测.结果 流式细胞仪检测MSCs表面标记CD44、CD71阳性,CD34、Ⅷ因子、desmin阴性;增殖细胞抗原(PCNA)蛋白表达显示HGF具有较强刺激MSCs增殖分化作用;彩色超声心动图检查提示:经治疗后MSCs+ AdHGF组左心室舒张期末容积(LVEDV)、左心室射血分数( LVEF)、短轴缩短率(FS)明显改善,差异有统计学意义(P＜0.05);DSA检测缺血区新生血管数MSCs+ AdHGF组较AdHGF组、MSCs组明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05);SPECT显示MSCs+ AdHGF组左室心肌增厚、灌注明显改善,运动增强,差异有统计学意义(P＜0.05);心肌HE染色血管密度,MSCs+ AdHGF组明显高于AdHGF组和MSCs组[(39.4±1.2)个/HPF vs.(36.5±1.4)个/HPF、(34.5±1.7)个/HPF,P＜0.05];心肌TUNEL染色法检测,MSCs+ AdHGF组、AdHGF组细胞凋亡率明显低于MSCs组(P＜0.05).结论 MSCs+AdHGF联合具有促进慢性缺血心肌新血管生成、抑制细胞凋亡、改善心功能等作用;MSCs+ AdHGF联合治疗缺血性心脏病作用较单纯HGF或MSCs移植更明显.
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