HPV16E7-HSP70融合表达质粒的构建及鉴定

来源 :数理医药学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：popularmp3007008

【摘要】

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采用分子克隆技术,首先将HSP70基因片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1-上,获得pcDNA-HSP重组质粒,然后采用PCR扩增技术,定点突变编码HPV16E7蛋白C末端锌指结构的基因序列,将该

【作者】

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高桂芳熊金虎王同祥伍欣星

【机构】

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武汉大学医学院病毒学研究所分子病毒室

【出处】

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数理医药学杂志

【发表日期】

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2004年1期

【关键词】

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人乳头状瘤病毒16型热休克蛋白70 HSP70 质粒免疫调节

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采用分子克隆技术,首先将HSP70基因片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1-上,获得pcDNA-HSP重组质粒,然后采用PCR扩增技术,定点突变编码HPV16E7蛋白C末端锌指结构的基因序列,将该突变的E7基因插入pcDNA-HSP重组质粒,通过粘端连接的方式构建pcd-HPV16E7-HSP70融合表达质粒,最后通过限制性内切酶酶切、PCR和DNA测序等技术鉴定.结果显示,重组融合表达质粒经酶切、PCR和DNA测序证明其突变位点、碱基及阅读框架均准确无误.

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