【摘 要】
：
旨在对转录组测序中单羔组对多羔组TGFβ2和PPP3CA基因的上、下调结果进行验证,并探究黔北麻羊TG Fβ2和PPP3CA基因对卵巢颗粒细胞的调控机制.本研究以单、多羔黔北麻羊母羊
【机 构】
：
贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室,贵阳550025贵州大学动物科学学院,贵阳550025;贵州省草业研究所,贵阳550006;
论文部分内容阅读
旨在对转录组测序中单羔组对多羔组TGFβ2和PPP3CA基因的上、下调结果进行验证,并探究黔北麻羊TG Fβ2和PPP3CA基因对卵巢颗粒细胞的调控机制.本研究以单、多羔黔北麻羊母羊为试验对象.通过RT-qPCR技术检测TGFβ2与PPP3CA基因在单、多羔黔北麻羊性腺轴中的表达水平;构建目的基因真核表达载体.培养黔北麻羊卵巢颗粒细胞,并利用脂质体转染法将pEGFP-N3-TGFβ2、pEGFP-N3-PPP3CA重组质粒导入卵巢颗粒细胞,检测培养基中雌二醇(E2)、孕酮(P4)的浓度.利用CCK-8和Annexin V-FITC法检测TGFβ2、PPP3CA基因对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响.随后,利用RT-qPCR从细胞水平检测超表达TGFβ2、PPP3CA基因对TGFβ2、PPP3CA、GnRHR、FSHR、BMP4、TIMP3基因表达的影响.RT-qPCR结果表明,TGFβ2与PPP3CA基因在被检测的组织中均有表达,且在单羔组中的表达量普遍高于多羔组;免疫荧光法证实,所培养的细胞为黔北麻羊卵巢颗粒细胞;TGFβ2与PPP3CA基因真核表达质粒导入细胞后,在极显著提高TGFβ2与PPP3CA基因表达的同时,能够极显著地抑制卵巢颗粒细胞中FSHR、GnRHR、BMP4、TIMP3基因的表达(P<0.01).细胞增殖与凋亡结果显示,TG Fβ2与PPP3CA基因能够促进颗粒细胞凋亡,抑制其增殖.酶联免疫吸附试验结果表明,TG Fβ2与PPP3CA基因能够显著促进E2的分泌,但对P4的分泌无显著影响.本研究成功构建了TG Fβ2、PPP3CA基因真核表达载体,荧光定量结果表明,超表达TGFβ2、PPP3CA基因抑制了繁殖相关基因的表达,提示TGFβ2、PPP3CA基因对山羊繁殖相关基因表达有一定的影响.为进一步研究TGFβ2、PPP3CA基因对黔北麻羊繁殖力的影响提供基础数据.
其他文献
随着时代的不断发展,教育的重要性逐渐突显出来,在开展教育的过程中,教师应该做到与时俱进,对现有的教育模式进行不断的变革,这样才能有效提高教学效率.中国近现代史纲要肩负
随着我国社会信息化进程的不断加快,教育部鼓励毕业生继续接受教育,完善职业学校毕业生直接升学的相关政策,建立健全中职高职职业教育的课程衔接体系.本文中介绍了高职教育衔
目的 探讨急性胰腺炎(AP)患者心理应激情况与医学应对方式的关系,研究基于信息-动机-行为技巧(information-motivation-behavioral skill,IMB)模型的综合干预对患者心理应激
高职院校作为给社会和国家培养输送应用型人才的办学机构,要重视对学生实践动手能力的科学培养,将其作为教学目标重点内容,从革新教学观念、丰富教学方式、改变教学评价等各
我院自1999年开始用计算机对病案首页信息进行编辑和查询。从工作中我们发现,由于首页编辑软件的设计是以住院次数为基础,所以给肿瘤专科医院的诊断治疗信息的查询带来了许
1 引言rn虚拟仿真(V R)技术是一种融合了微传感器技术、人工智能技术、计算机技术和生物工程技术的全新技术.它通过多种传感器和终端设备模拟出一个虚拟仿真空间,使用者在此
我国的民航及航天航空技术正在高速发展,在这样的发展的趋势下,国内的教育事业需要为社会提供源源不断的高素质人才,同时也需要逐渐提高院校专业培养的素质要求,使得学生能够
旨在获得猪CCA R1基因的完整CDS序列,研究其亚细胞定位和表达特性,探究其对细胞增殖的影响和作用机制.本研究以1日龄马身猪肾组织cDNA为模板,采用RT-PCR技术分段扩增猪CCA R1
网络教学在这个年代几乎随处可见,它促进人们的经济发展,提高了人民的生活水平,缩小国与国之间的距离,更缩小了人与人之间的距离,为人类的科学技术进步做出了巨大的贡献.特别
文章针对高职《变频调速技术》课程重理论、轻实践的现实问题,提出了一套考试改革的方法,设计了考试模式、计分方法、补考清考、题库更新等环节,并进行了为期两年的实践应用.