【摘 要】
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类钙调蛋白(CaM-likeprotein,CML)在植物抵抗逆境中发挥了重要的作用,因此研究CML基因是植物抗逆分子育种的一个重要分子基础.本实验室在前期工作中筛选得到1个片段大小为264
【机 构】
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吉林农业大学农学院,长春,130118
【基金项目】
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农业部转基因生物新品种培育科技重大专项(2016ZX08004-004-003);国家重点研发计划课题(2017YFD0101305);国家自然科学基金面上项目(31571689)共同资助
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类钙调蛋白(CaM-likeprotein,CML)在植物抵抗逆境中发挥了重要的作用,因此研究CML基因是植物抗逆分子育种的一个重要分子基础.本实验室在前期工作中筛选得到1个片段大小为264bp的大豆CML基因,对该基因序列设计特异性引物,利用PCR技术对该基因进行扩增,并获得大小为264 bp的片段,利用无缝克隆技术连接到pMD18T载体上,获得克隆载体.通过对该基因的核苷酸序列分析,在NCBI上发现该基因序列与大豆Calcium-binding protein(CML38-like)基因序列相似度为98.53％.目前对CML38-like基因的功能还未见报道,本研究根据克隆测序得到的基因序列构建系统进化树并分析,随后对该基因的蛋白质二级结构和蛋白质三级结构进行预测,发现该基因可能对大豆抗旱有着一定的影响.最后通过克隆载体构建CML38-like基因的过表达载体以及RNA干扰表达载体.本研究为鉴定大豆CML38-like基因的功能和了解该基因对大豆的非生物胁迫反应的影响提供了理论依据.
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