血管生成抑制因子人内皮抑素基因的克隆与原核表达

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目的:构建血管生成抑制因子人内皮抑素非融合蛋白大肠杆菌表达载体.方法:实验于2004-02/12在中山大学生命科学院医药分子生物学实验室完成,表达质粒由中山大学医药分子实验室保存,肝细胞来源于南方医科大学珠江医院引产胎儿肝脏.用反转录多聚合酶链反应得到人内皮抑素全基因,连接PGEM-T载体,在16℃下以进行16 h连接反应,转化大肠杆菌DH5α,对所获克隆扩大培养,提取质粒经EcoRI,BamHI酶切鉴定.将带有插入片段的重组质粒命名为PGEM-Tendo.对其阳性克隆扩大培养,大量提取质粒,以T7,SP
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