酵母单杂交诱饵质粒pHis—3NF和pLacZ—3NF的构建与鉴定

来源 :癌变．畸变．突变 | 被引量 : 0次 | 上传用户：bblp520a

【摘要】

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目的:构建可以与酵母染色体组发生重组的质粒pHis-NF和pLacZ-NF. 方法:人工合成44 bp的三重NF-κB元件寡聚核苷酸,通过DNA重组技术将靶序列NF-κB串定向插入细菌-酵母穿梭质

【作者】

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牛永东许丽艳李恩民

【机构】

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汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头大学医学院肿瘤病理研究室

【出处】

：

癌变．畸变．突变

【发表日期】

：

2003年1期

【关键词】

：

核转录因子 NF-ΚB pHis-3NF pLacZ-3NF 酵母单杂交 Nuclear factors NF_κB pHis_3NF pLacZ_3NF

【基金项目】

：

国家自然科学基金，广东省自然科学基金，广东省高校自然科学基金，广东省医药卫生科研项目，汕头大学校科研和教改项目

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目的:构建可以与酵母染色体组发生重组的质粒pHis-NF和pLacZ-NF. 方法:人工合成44 bp的三重NF-κB元件寡聚核苷酸,通过DNA重组技术将靶序列NF-κB串定向插入细菌-酵母穿梭质粒pHisi和pLacZi的多克隆位点MCS后,用特异性酶切、琼脂糖凝胶电泳、PAGE电泳、DNA测序等方法进行鉴定. 结果:PAGE电泳和DNA测序分析证实定向插入的寡聚核苷酸串与预先设计的插入序列一致. 结论:成功地构建了重组质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF,为借助酵母单杂交实验技术平台深入探讨NF-

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