【摘 要】
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目前,我国现有的商品化灭活苗无法完全保护免疫鸡免受H9N2亚型禽流感病毒流行株的感染。病毒样颗粒(Virus-like particle, VLP)疫苗的免疫效果及其安全性优于灭活苗,成为近年
【基金项目】
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上海市科技兴农重点攻关项目(沪农科攻字(2015字)第1-11字号);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2017JB04)
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目前,我国现有的商品化灭活苗无法完全保护免疫鸡免受H9N2亚型禽流感病毒流行株的感染。病毒样颗粒(Virus-like particle, VLP)疫苗的免疫效果及其安全性优于灭活苗,成为近年研究的热点。因而,本研究旨在建立一种H9N2亚型流感病毒样颗粒疫苗制备的方法。将优化的H9N2亚型流感病毒的HA、NA基因和未优化的HA、NA基因分别插入到p Fast BackTMDual载体上,得到相应的重组供体。这些重组供体转化至含Bacmid的DH10Bac感受态细胞中,获得含有目的基因的两种重组杆粒。将这两种重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,红细胞凝集试验、SDS-PAGE和Western blot试验结果皆证实,优化的HA、NA基因编码的蛋白在Sf9昆虫细胞中获得了成功表达。此外,通过透射电子显微镜观察细胞上清的浓缩液,能检测到VLP。这些试验表明,本研究在Sf9昆虫表达系统中成功表达了H9N2亚型禽流感病毒的HA和NA蛋白,并形成了VLP,为进一步研究该病毒VLP疫苗奠定了基础。
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