探讨人重组促红细胞生成素(rhEPO)对新生大鼠高体积分数氧(高氧)肺损伤炎症的影响。
方法将72只新生SD大鼠按随机数字表法分为4组：对照组、支气管肺发育不良(BPD)组、高氧＋低剂量促红细胞生成素[EPO(L)]组、高氧＋高剂量促红细胞生成素[EPO(H)]组。BPD组、高氧＋EPO(L)组和高氧＋EPO(H)组新生大鼠暴露于850 mL/L氧气中，高氧＋EPO(L)组和高氧＋EPO(H)组分别于高氧暴露后1、3、7 d给予800 IU/kg、2 000 IU/kg rhEPO皮下注射，对照组和BPD组注射等量9 g/L盐水。实验开始后3、7、14 d记录各组体质量。HE染色，光镜下观察其肺组织形态结构的改变，检测肺组织放射状肺泡计数(RAC)。免疫荧光染色法检测核因子-κB(NF-κB)的表达，Western blot技术检测肺组织磷酸化NF-κB(pNF-κB)、抑制蛋白(IκB)及Caspase-3的表达，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液中白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。
结果1．BPD组新生大鼠14 d时体质量明显低于对照组[(18.97±3.21) g比(27.97±2.30) g]，差异有统计学意义(P<0.05)；14 d时，高氧＋EPO(L)组和高氧＋EPO(H)组新生大鼠体质量[(24.16±2.15) g、(26.04±1.97) g ]均显著高于BPD组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。2.HE染色观察肺组织形态学结构显示，与对照组比较，BPD组3 d肺泡间隔有少量炎性细胞渗出，7 d更为明显，肺泡腔有渗出，14 d出现肺泡数量减少，肺大疱形成，间隔增厚，RAC明显减少(5.50±1.29比14.33±2.80)，差异均有统计学意义(P<0.01)；高氧＋EPO(L)组和高氧＋EPO(H)组新生大鼠肺组织病理改变减轻，炎性细胞浸润减少，RAC值在14 d均明显高于BPD组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。3.免疫荧光结果显示，BPD组NF-κB p65阳性细胞数目明显增多，荧光强度增强，给予EPO处理后可减少NF-κB p65阳性细胞数目，荧光强度减弱。4.Western blot结果显示，与对照组比较，BPD组pNF-κB p65及Cleaved Caspase-3显著增高，差异均有统计学意义(均P<0.05)；IκB明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)；与BPD组比较，高氧＋EPO(L)组和高氧＋EPO(H)组pNF-κB p65及Cleaved Caspase-3显著降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)，IκB均明显升高，差异均有统计学意义(均P<0.05)。5.ELISA结果显示，与对照组比较，BPD组IL-1β表达明显增加，差异有统计学意义(P<0.05)；高氧＋EPO(L)组和高氧＋EPO(H)组IL-1β表达则显著低于BPD组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论EPO能通过NF-κB途径抑制细胞炎性反应，减轻高氧诱导的肺组织凋亡，对新生大鼠高氧肺损伤起保护作用。