转铁蛋白受体介导的Bcl-2 shRNA对U251细胞生长的抑制

来源 :中华肿瘤防治杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:YAOGUOCHUN
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目的:构建Bcl-2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列的表达载体并研究其对神经肢质瘤细胞U251生长的抑制作用。方法:针对Bcl-2基因编码shRNA的序列,克隆到携带绿色荧光蛋白基因的载体,经酶切电泳和DNA测序鉴定。采用转铁蛋白一多聚乙烯亚胺介导的转染方法将重组的shRNA质粒转入U251细胞后,通过倒置荧光显微镜和流式细胞仪观察绿色荧光蛋白的表达,用免疫细胞化学的方法检测Bcl-2蛋白表达水平;采用MTT法测定细胞增殖情况。结果:编码短发夹状的RNA序列被成功地插入
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