【摘 要】
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目的 探讨丝裂霉素通过下调高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因的表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响.方法 用不同浓度的丝裂霉素干预人胃癌MGC-803细胞,CCK-8法检测丝裂霉素
【机 构】
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河南省中医院、河南中医药大学 第二附属医院肿瘤内科,河南 郑州450002
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目的 探讨丝裂霉素通过下调高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因的表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响.方法 用不同浓度的丝裂霉素干预人胃癌MGC-803细胞,CCK-8法检测丝裂霉素对MGC-803细胞增殖抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50),选择接近1/2 IC50值的丝裂霉素浓度即2μmol·L-1进行后续实验.将细胞分为4组:空白对照组(未行任何处理)、丝裂霉素组(2μmol·L-1丝裂霉素处理)、第1转染组(转染空载质粒后以2μmol·L-1丝裂霉素处理)和第2转染组(转染HMGB1过表达载体质粒后以2μmol·L-1丝裂霉素处理).蛋白质印迹法检测HMGB1蛋白表达水平,通过脂质体转染技术恢复HMGB1的表达,CCK-8实验检测细胞增殖能力(OD值),AnnexinⅤ-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡情况.结果 空白对照组、丝裂霉素组、第1转染组和第2转染组的HMGB1蛋白相对表达水平分别为0.44±0.04,0.18±0.02,0.18±0.02和0.40±0.05;这4组的细胞增殖能力分别为0.57±0.06,0.32±0.03,0.33±0.03和0.52±0.05;这4组的细胞凋亡率分别为(4.36±1.22)％,(32.05±5.29)％,(32.64±5.36)％ 和(7.01±2.38)％.上述指标:丝裂霉素组与空白对照组相比,或第2转染组与丝裂霉素组相比,差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 丝裂霉素可通过下调HMGB1的表达,抑制胃癌MGC-803细胞增殖并促进细胞凋亡.
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