基于麻疹病毒IgG抗体酶联免疫吸附试验的尿素变性亲和力检测方法建立

来源 :中国疫苗和免疫 | 被引量 : 2次 | 上传用户:bird2000
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目的 建立基于麻疹病毒(Measles virus, MV)IgG抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒的尿素变性亲和力检测方法。方法 选取2018-2019年广西MV IgG阳性的麻疹病例血清标本,采用亲和力试剂盒检测MV IgG亲和力。选择低和高亲和力血清标本各6份,在ELISA酶标板中加入尿素处理后,检测IgG浓度,计算IgG浓度下降率;在亲和力试验中改变尿素条件,计算高低亲和力标本的相对亲和力指数(Relative avidity index, RAI)比值,确定本研究方法的最优实验条件。选择100份血清标本同时采用本研究建立的方法和成品试剂盒检测MV IgG亲和力,计算检测一致率。结果 6份低亲和力和6份高亲和力血清标本RAI分别为24%-39%、67%-86%;当4mol/L(pH6.4-7.4)、5mol/L(pH6.4-7.4)和6mol/L(pH6.4-7.0)的尿素处理酶标板后,MV IgG浓度下降率≤48.67%;当尿素条件为4mol/L(1-40min)、5mol/L(1-20min)、6mol/L(1-5min)时,IgG浓度下降率≤47.53%;尿素条件为6mol/L(pH7.0)和6mol/L(5min)时RAI比值分别为2.30和2.43。本研究亲和力试验的尿素处理最优条件为6mol/L(pH7.0)的尿素在37℃作用5min;该方法与成品试剂盒的亲和力检测一致率为92%。结论 本研究建立的基于MV IgG抗体ELISA试剂盒的尿素变性亲和力检测方法简便可行且结果可靠。
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