【摘 要】
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目的建立荧光定量RT—PCR检测肺癌及正常肺组织中人类有机阴离子转运多肽(organic anion transportingpolypeptide,OATP)OATP-B、OATP-D mRNA表达的方法,了解肺癌和正常肺组
【机 构】
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山东大学医学院病理学教研室,江苏省淮安市第一人民医院,青岛市立医院病理科,
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目的建立荧光定量RT—PCR检测肺癌及正常肺组织中人类有机阴离子转运多肽(organic anion transportingpolypeptide,OATP)OATP-B、OATP-D mRNA表达的方法,了解肺癌和正常肺组织中OATP-B、OATP-D mRNA的表达水平。方法利用RT-PCR方法从肺癌及正常肺组织中扩增出目的基因片段,用TA克隆的方法将基因片段插入到PGEM-T质粒载体中,在Line-Gene荧光定量检测系统上建立检测OATP-B、OATP-D mRNA表达的标准曲线,并通过40例肺癌及正常肺组织标本进行验证。结果成功构建了OATP基因的质粒重组子,建立了在mRNA水平定量检测OATP-B、OATP-D基因的标准曲线,相关系数为0.998。以荧光定量RT—PCR法检测,OATP-B、OATP-D的mRNA在肺癌及正常肺组织中均有表达,且肺癌中OATP-B、OATP-D mRNA的表达水平高于正常肺组织(P<0.05)。结论成功建立了荧光定量RT-PCR检测OATP-B、OATP-D mRNA表达的方法,检测结果用绝对拷贝数表示,定量准确可靠,敏感性高。
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