观察单轴拉力刺激对肌腱干细胞(TDSCs)炎性因子表达的影响。
方法通过胶原酶法和低密度接种法,从人的股薄肌腱中分离TDSCs;流式细胞术检测分离出的TDSCs的表面标记因子;体外诱导检测其多向分化能力。将细胞接种在体外细胞力学加载仪上,分别施加4%、8%和10%的单轴拉力。显微镜观察拉力刺激后的排列情况。荧光定量PCR和Western blot观察拉力后TDSCs环氧合酶-2(COX-2)和基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的基因和蛋白表达情况。
结果从人股薄肌腱中分离出TDSCs,表达CD29、CD44和CD105阳性,CD45和CD14阴性。拉力刺激4 h,TDSCs未发生重新排列。4%拉力强度下MMP-1基因表达为0.090±0.007,与0%的0.247±0.032比较显著降低(P<0.05);COX-2基因表达为0.005±0.001,与0%的0.005±0.001比较差异无统计学意义(P>0.05)。与0%拉力强度比较,8%拉力强度下MMP-1和COX-2基因表达差异均无统计学意义(8%分别为0.168±0.040和0.007±0.001,而0%分别为0.134±0.075和0.006±0.003)(P>0.05)。10%拉力强度下MMP-1和COX-2基因表达较0%拉力强度比较差异均显著升高(10%分别为0.047±0.003和0.496±0.036,而0%分别为0.011±0.003和0.005±0.003)(P<0.05)。蛋白表达与基因表达相一致,与0%拉力强度比较,4%拉力强度下COX-2和MMP-1蛋白表达均降低,8%拉力强度下COX-2和MMP-1蛋白表达均无明显变化,10%拉力强度下COX-2蛋白表达升高,MMP-1有微弱升高。
结论不同强度单轴拉力引起炎性因子的表达不同,低强度拉力降低炎性因子表达,高强度拉力升高炎性因子表达。