目的探讨高频超声、超声造影、^99m锝-甲氧基异丁基异腈(^99mTc-MIBI)单光子发射型计算机断层显像/计算机断层扫描（SPECT/CT）在难治性甲状旁腺功能亢进症术前定位中的诊断效能。方法收集2015年8月至2017年8月青岛大学附属医院收治的难治性甲状旁腺功能亢进症18例,患者术前均接受高频超声、超声造影及^99mTc-MIBI SPECT/CT显像等检查,以术后病理结果为"金标准",比较3种检查方法的诊断效能。结果 18例患者共手术切除73枚结节,经病理证实71枚为甲状旁腺增生结节,高频超声、超声造影及^99mTc-MIBI SPECT/CT显像敏感度分别为98.59%、94.37%、78.87%,准确性分别为97.26%、94.52%、78.08%。高频超声与超声造影在定位甲状旁腺增生结节中的优势差异无统计学意义（P=0.250）,两者的诊断效能均优于^99mTc-MIBI SPECT/CT显像（P=0.001、0.012）,联合检查可提高定位的特异度（50.00%vs 100.00%）,与^99mTc-MIBI SPECT/CT显像联合后可进一步提高定位的准确性（98.63%vs 100.00%）。结论高频超声与超声造影及^99mTc-MIBI SPECT/CT显像联合后可对难治性甲状旁腺功能亢进做出较为全面的术前定位诊断。