翻白草总DNA的提取与ISSR-PCR体系的建立与优化

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[目的]针对翻白草ISSR的反应特点,建立稳定可靠的ISSR分子指纹标记反应体系,为进一步研究翻白草的居群差异奠定基础。[方法]通过筛选引物并设定影响翻白草ISSR反应的诸因子的不同浓度,检测ISSR不同反应体系的扩增效果;通过分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立翻白草ISSR稳定可靠的反应体系。[结果]首次建立了可用于翻白草ISSR-PCR分析的最适宜的反应体系,确定了25μl PCR反应体系中各试剂终浓度:1×Buffer缓冲液,1U TaqDNA聚合酶,2.5mmol/LMg^2
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