一种定量评估人-(人-鼠)杂交瘤细胞产生人单克隆抗体稳定性的方法

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yoki1120
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本文介绍一种定量评估人-(人-鼠)杂交瘤细胞产生人单克隆抗体的稳定性的方法。对一株经EB病毒转化病人PBL与种间骨髓瘤细胞系SHM-D33融合得到的产生肾综合征出血热病毒人单抗的杂交瘤细胞系86-2做了定量的评估。用有限稀释法,连续2次克隆化后,随机选一定数目的亚克隆细胞计数,直接种入Terasaki板,另一些亚克隆扩增后也种入Terasaki板,出现镜下可见的单细胞克隆时,甲醇 "原位" 固定后直接免疫荧光法计数抗体分泌细胞克隆与不分泌克隆,用Luria-Delbrück公式算出单个细胞每代的抗体阴性变异机率为(7-20)×10-4,与小鼠杂交瘤稳定性相当。本方法可较准确地对杂交瘤抗本分泌稳定性进行定量评估,对筛选亲代骨髓瘤细胞系,分析影响稳定性的因素,探索增强稳定性的措施有一定意义。

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