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目的
探讨柠檬酸镧对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的机制。
方法分别使用不同浓度的环巴胺-KAAD以及柠檬酸镧处理人肝癌细胞株SMMC-7721。采用MTT法检测细胞增殖,采用AnnexinⅤ/PI流式细胞术检测细胞凋亡率。采用蛋白印迹(Western blot)检测CyclinD1、p21、Caspase-3、bcl-2、Gli1、Shh表达。采用实时定量(q-PCR)检测Gli1、Shh的表达。
结果对照组、0.1 mmol/L柠檬酸镧组、15 μmol/L环巴胺-KAAD组处理SMMC-7721细胞48 h,Caspase-3蛋白相对表达量分别为(0.36±0.05)、(0.67±0.10)、(0.89±0.11);bcl-2蛋白相对表达量分别为(0.61±0.10)、(0.48±0.05)、(0.24±0.08);CyclinD1蛋白分别为(1.41±0.21)、(0.71±0.08)、(0.53±0.11);p21蛋白分别为(0.49±0.08)、(0.97±0.09)、(1.55±0.13);Gli1、Shh的mRNA和蛋白表达均有不同程度的下降。Annexinⅴ-FITC双染流式细胞术显示柠檬酸镧组和环巴胺-KAAD组增加SMMC-7721细胞凋亡率。
结论柠檬酸镧能抑制SMMC-7721细胞增殖、促进其凋亡。其机制可能和柠檬酸镧抑制Hh信号通路相关。