人神经生长因子重组腺伴随病毒载体的构建

来源 :西安交通大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kkhaizi

【摘要】

：

目的为了研究人神经生长因子(hNGF)基因导入急性脊髓损伤(SCI)模型的治疗作用,构建并产生重组腺伴随病毒(AAV)载体.方法将hNGF外源性核酸片段插入AAV-shuffer质粒pSSHG-Neo的

【作者】

：

马巍刘淼杨广笑王全颖

【机构】

：

西安交通大学第一医院骨科,西安华广生物工程有限公司

【出处】

：

西安交通大学学报：医学版

【发表日期】

：

2004年3期

【关键词】

：

hNGF基因重组腺伴随病毒(rAAV) 基因转移 human nerve growth factor gene recombinant adeno-assoc

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目的为了研究人神经生长因子(hNGF)基因导入急性脊髓损伤(SCI)模型的治疗作用,构建并产生重组腺伴随病毒(AAV)载体.方法将hNGF外源性核酸片段插入AAV-shuffer质粒pSSHG-Neo的KpnⅠ-BamHⅠ位点构建AAV.用腺病毒辅助质粒pFG140代替野生型腺病毒,包装质粒pAAV/Ad及已构建的pSSHG-Neo三质粒磷酸钙共沉淀法在肾胚胎293细胞系中同源重组包装rAAV.使用地高辛标记的斑点杂交方法测定重组病毒滴度.结果成功构建了重组病毒质粒pSSHG/hNGF,经蔗糖梯度离心法获

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