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目的：利用CRISPR/Cas9技术构建人Ku70基因稳定敲除的HeLa细胞株，并检测其生物学功能。方法：设计并构建向导RNA载体pCas-gRNA和同源重组供体DNA载体pBackZero-T-Ku70，2种重组质粒共转染HeLa细胞，加入潮霉素B进行抗性筛选，通过基因组PCR和Western印迹检验Ku70基因是否被敲除；进而，选择Ku70稳定敲除的细胞株，分别采用CCK-8和Transwell实验检测细胞增殖和迁移能力；此外，提取细胞总RNA，反转录成cDNA后用荧光定量PCR仪检测5种miRNA（