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盐酸克伦特罗是一种β－兴奋剂，猪食用该物质后可在代谢过程中促进体内蛋白质的合成，加速脂肪的转化和分解，从而提高猪肉的瘦肉率，因此其被称为“瘦肉精”。瘦肉精由于使用量大、使用时间长，加之在猪体内代谢慢，所以其在猪体内的残留量很大。如果这些残留的瘦肉精通过食物链进入人体，便可导致人体食物中毒，因此一直被禁用。然而一些养猪户不顾相关部门的规定，在饲料中掺入大量瘦肉精，视人们的食用安全而不顾，严重扰乱了肉类食品市场的秩序，给人们的日常生活带来很大影响。在这种情境之下，如何采用科学快速的方法对猪肉中的瘦肉精进行检测，实现有效监管成为亟待解决的问题。
对于猪肉中克伦特罗的检测而言，样品前处理显得尤为重要。为此，本文介绍了一种快速准确的检测方案，该方案使用LabTech公司全自动固相萃取仪一定量浓缩系统进行样品前处理工作，样品经提取、初步净化后，全自动完成猪肉样品的固相萃取一洗脱液浓缩一溶剂置换过程，最终样品可直接用于液相检测，极大地简化了实验人员的工作步骤，液相色谱检测准确、样品测定平行性好。回收率高。
仪器与试剂
仪器：LabTech PrepElite-VS全自动固相萃取一定量浓缩仪，LabTechLC600二元梯度高效液相色谱系统；
试剂：乙酸乙酯，10％碳酸钠溶液、0.1 mol／L的盐酸溶液、2.5mol／L氢氧化钠溶液、甲醇(色谱级)、4％氨水甲醇、去离子水。
实验方法样品前处理
1.提取方法：将50g猪肉平均分成10份，准确进行称重。取其中5份加入15mL乙酸乙酯，3mL10％碳酸钠溶液置于50mL离心管中，10000rpmT均质2min，6000 rpm下离心2min，将上清液转入另一离心管中。用15mL乙酸乙酯重复提取残渣，合并乙酸乙酯。向乙酸乙酯提取液中加入5mL、0.1moI／L的盐酸溶液，涡旋混合1min，然后在6000rpmT离心lmin，收集下层水相。重复萃取一次，合并下层水相，用2.5moI／L氢氧化钠溶液调节pH值至5.2。取另外5份，破碎后加入1.0μg／mL克伦特罗标准液1 mL，按上述方法进行提取操作，作为加标样品。PrepElite-VS方法设定界面如图1所示。
2.样品净化：
SPE小柱：ProElut Pxc90mg／6mll
活化：依次加入4.5m L甲醇、4.5mL水和4.5mL、30mmol／L盐酸，对SPE柱进行活化，
上样：将提取液加入小柱中，流出液弃去；
淋洗依次用4.5mL水和4.5mL甲醇淋洗，氮气吹干10min，
洗脱：7.5mL、4％氨水甲醇洗脱j
在线浓缩50℃下在线浓缩，进行流动相(甲醇：水=35：65)置换，自动定容到1mL。
色谱柱：C18柱，250min×4.6mm，5μm
流动相甲醇：水=35：65；
流速1mL／min：
进样量20μL：
紫外检测器：244nm。
2.标准品及样品测定
(1)克伦特罗标准溶液的配置准确称取克伦特罗标准品，用甲醇配成浓度为25μg／mL的标准储备液，用流动相甲醇+水(35：65)将浓度稀释成0.025μg／mL、0.05μg／mL，0.25μg／mL、1.0μg／mL、2.5μg／mL标准液；
(2)将浓缩后的试样采用0.45μm的针筒式微孔过滤膜过滤，滤液待进行液相色谱测定：
(3)吸取50μL标准溶液及试样液注入液相色谱仪，进行定性，定量分析。
结果和讨论克伦特罗标准品的液相色谱图(如图2所示)。
克伦特罗标准品标准曲线
克伦特罗标准品浓度0.025μg／mL、0.05μg／m L、0.25μg／m L、1.0μg／mL、2.5μg／mL，线性方程为Y=361552X-4061.8，线性系数为R2=0.9998。如图3所示。
加标样品回收率
加标样品回收率结果见下表1所示，加标样品色谱图如图4所示。
未加标样品检测结果
未加标样品检测结果见图5所示，经计算，未加标样品未检出克伦特罗成分。克伦特罗标准品(1.0μg／mL)，未加标样品，加标样品对比图
克伦特罗标准品、未加标样品。加标样品对比色谱图如图6所示。
结语
本实验采用LabTech全自动固相萃取一定量浓缩系统进行猪肉样品前处理，自动化程度高，可以解决传统固相萃取步骤操作繁琐、溶剂挥发，过柱流速难以控制等问题。同时，收集到的洗脱液可以在线浓缩、溶剂置换，定容过程，极大地简化了繁琐的样品前处理工作，保护操作者免受各种有机溶剂毒害，而且回收率稳定、可靠(回收率高达89.53％)。
采用高效液相色谱方法对样品中克伦特罗进行定性、定量检测，方便快速，标准曲线线性系数为R2=0.9998，对加标样品和未加标样品进行精确浓度检测，准确计算回收率，仪器操作简单，稳定性高、RSD为1.04％。结果显示，猪肉样品中未检出克伦特罗。
对于猪肉中克伦特罗的检测而言，样品前处理显得尤为重要。为此，本文介绍了一种快速准确的检测方案，该方案使用LabTech公司全自动固相萃取仪一定量浓缩系统进行样品前处理工作，样品经提取、初步净化后，全自动完成猪肉样品的固相萃取一洗脱液浓缩一溶剂置换过程，最终样品可直接用于液相检测，极大地简化了实验人员的工作步骤，液相色谱检测准确、样品测定平行性好。回收率高。
仪器与试剂
仪器：LabTech PrepElite-VS全自动固相萃取一定量浓缩仪，LabTechLC600二元梯度高效液相色谱系统；
试剂：乙酸乙酯，10％碳酸钠溶液、0.1 mol／L的盐酸溶液、2.5mol／L氢氧化钠溶液、甲醇(色谱级)、4％氨水甲醇、去离子水。
实验方法样品前处理
1.提取方法：将50g猪肉平均分成10份，准确进行称重。取其中5份加入15mL乙酸乙酯，3mL10％碳酸钠溶液置于50mL离心管中，10000rpmT均质2min，6000 rpm下离心2min，将上清液转入另一离心管中。用15mL乙酸乙酯重复提取残渣，合并乙酸乙酯。向乙酸乙酯提取液中加入5mL、0.1moI／L的盐酸溶液，涡旋混合1min，然后在6000rpmT离心lmin，收集下层水相。重复萃取一次，合并下层水相，用2.5moI／L氢氧化钠溶液调节pH值至5.2。取另外5份，破碎后加入1.0μg／mL克伦特罗标准液1 mL，按上述方法进行提取操作，作为加标样品。PrepElite-VS方法设定界面如图1所示。
2.样品净化：
SPE小柱：ProElut Pxc90mg／6mll
活化：依次加入4.5m L甲醇、4.5mL水和4.5mL、30mmol／L盐酸，对SPE柱进行活化，
上样：将提取液加入小柱中，流出液弃去；
淋洗依次用4.5mL水和4.5mL甲醇淋洗，氮气吹干10min，
洗脱：7.5mL、4％氨水甲醇洗脱j
在线浓缩50℃下在线浓缩，进行流动相(甲醇：水=35：65)置换，自动定容到1mL。
色谱柱：C18柱，250min×4.6mm，5μm
流动相甲醇：水=35：65；
流速1mL／min：
进样量20μL：
紫外检测器：244nm。
2.标准品及样品测定
(1)克伦特罗标准溶液的配置准确称取克伦特罗标准品，用甲醇配成浓度为25μg／mL的标准储备液，用流动相甲醇+水(35：65)将浓度稀释成0.025μg／mL、0.05μg／mL，0.25μg／mL、1.0μg／mL、2.5μg／mL标准液；
(2)将浓缩后的试样采用0.45μm的针筒式微孔过滤膜过滤，滤液待进行液相色谱测定：
(3)吸取50μL标准溶液及试样液注入液相色谱仪，进行定性，定量分析。
结果和讨论克伦特罗标准品的液相色谱图(如图2所示)。
克伦特罗标准品标准曲线
克伦特罗标准品浓度0.025μg／mL、0.05μg／m L、0.25μg／m L、1.0μg／mL、2.5μg／mL，线性方程为Y=361552X-4061.8，线性系数为R2=0.9998。如图3所示。
加标样品回收率
加标样品回收率结果见下表1所示，加标样品色谱图如图4所示。
未加标样品检测结果
未加标样品检测结果见图5所示，经计算，未加标样品未检出克伦特罗成分。克伦特罗标准品(1.0μg／mL)，未加标样品，加标样品对比图
克伦特罗标准品、未加标样品。加标样品对比色谱图如图6所示。
结语
本实验采用LabTech全自动固相萃取一定量浓缩系统进行猪肉样品前处理，自动化程度高，可以解决传统固相萃取步骤操作繁琐、溶剂挥发，过柱流速难以控制等问题。同时，收集到的洗脱液可以在线浓缩、溶剂置换，定容过程，极大地简化了繁琐的样品前处理工作，保护操作者免受各种有机溶剂毒害，而且回收率稳定、可靠(回收率高达89.53％)。
采用高效液相色谱方法对样品中克伦特罗进行定性、定量检测，方便快速，标准曲线线性系数为R2=0.9998，对加标样品和未加标样品进行精确浓度检测，准确计算回收率，仪器操作简单，稳定性高、RSD为1.04％。结果显示，猪肉样品中未检出克伦特罗。