丙型肝炎病毒基因片段体外转录和真核表达载体的构建与鉴定

来源 :临床内科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hjwuser

【摘要】

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目的探讨基因免疫和基因治疗用于丙型肝炎病毒(HCV)疫苗及抗HCV感染的可行性,构建含HCV基因片段的体外转录和真核表达载体.方法从HCV慢性感染患者血清中提取总RNA后, 采用逆

【作者】

：

王鲁文许丽萍龚作炯杨丽华

【机构】

：

430060,浙江大学医学院

【出处】

：

临床内科杂志

【发表日期】

：

2003年3期

【关键词】

：

肝炎病毒丙型载体基因构建 Hepatitis C virus Vector Gene construction

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目的探讨基因免疫和基因治疗用于丙型肝炎病毒(HCV)疫苗及抗HCV感染的可行性,构建含HCV基因片段的体外转录和真核表达载体.方法从HCV慢性感染患者血清中提取总RNA后, 采用逆转录PCR 扩增出含有5'NCR和编码核心蛋白C区上游基因片段的HCV-cDNA,经Hind Ⅲ 和EcoRⅠ双酶切后,定向克隆入体外转录载体pGEM3ZF(-)和真核表达载体pBBS212中,构建成pGEM3ZF-HCV和pBBS212-HCV重组表达质粒,并经双酶切鉴定.结果用Hind Ⅲ 和EcoRⅠ双酶切鉴定证实

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