miR-148b-3p通过调控Wnt信号通路对胶质瘤细胞侵袭和迁移的影响

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目的

探讨miR-148b-3p对胶质瘤细胞侵袭和迁移的影响及其作用机制。

方法

体外培养人胶质瘤U251细胞株,采用Lipofectamine 2000转染试剂将miR-148b-3p模拟物或阴性对照转染至U251细胞,分别记为miR-148b-3p组和阴性对照组,同时设置空白对照组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测转染效果,Transwell实验检测各组U251细胞的侵袭能力,划痕实验检测各组U251细胞的迁移能力,酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的水平,Western blot法检测细胞中Wnt信号通路相关蛋白的表达。

结果

qRT-PCR显示,miR-148b-3p组U251细胞中miR-148b-3p的表达水平为2.45±0.25,高于阴性对照组(0.97±0.10)和空白对照组(1.00±0.11),差异均有统计学意义(均P<0.05)。Transwell实验显示,miR-148b-3p组侵袭细胞数为(50.62±5.36)个,与阴性对照组[(108.84±10.14)个]和空白对照组[(113.40±10.06)个]比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。划痕实验结果显示,miR-148b-3p组细胞的迁移率为(23.19±2.50)%,与阴性对照组[(51.81±5.25)%]和空白对照组[(52.06±5.33)%]比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。过表达miR-148b-3p能够抑制MMP-2和MMP-9的表达,下调Wnt1和GSK-3β蛋白的表达。

结论

miR-148b-3p能够通过抑制Wnt信号通路的激活抑制人胶质瘤U251细胞的侵袭和迁移能力。

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