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目的:构建成骨细胞特异性转录因子Cbfal双表达载体,以期用于成骨的体内、外研究。方法:以舍有全长eDNA的pCMV/Cbfal为模板,PCR扩增Cbfal,T-A克隆,酶切亚克隆到plRES2。EGFP载体上.酶切、PCR及测序鉴定正确后命名为plRES2-EGFP,脂质体转染NIH3T3细胞,G418筛选稳定表达后,提取细胞的总蛋白.Westernblot检测Cbfal蛋白的表达,以未转染组为对照。结果:酶切、PCR及测序证实plRES2.EGFP/Cbfal载体序列正确,脂质体法转染NIH3T3细胞