【摘 要】
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目的 探究慢病毒介导TREM-2质粒转染促进骨髓间充质干细胞向神经细胞转化的研究.方法 利用基因过表达技术,构建TREM-2过表达载体,慢病毒转染骨髓间充质干细胞(BMSCs),利用流式细胞仪检测BMSCs的表面蛋白,利用RT-PCR和Western blot检测神经细胞表面蛋白胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)以及神经丝蛋白(neurofilament protein
【机 构】
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山东省德州市中医院神经外科,山东德州253000;青岛大学附属医院崂山院区手术室,山东青岛266003
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目的 探究慢病毒介导TREM-2质粒转染促进骨髓间充质干细胞向神经细胞转化的研究.方法 利用基因过表达技术,构建TREM-2过表达载体,慢病毒转染骨髓间充质干细胞(BMSCs),利用流式细胞仪检测BMSCs的表面蛋白,利用RT-PCR和Western blot检测神经细胞表面蛋白胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)以及神经丝蛋白(neurofilament protein,NF),巢蛋白的表达. 结果 在第2代BMSCs,表面蛋白CD29阳性率为98.03％,CD90阳性率为96.92％,CD45阴性率为77.2％,共表达CD29、CD90且CD45表达阴性的细胞数占总细胞数的96.89％.BMSCs细胞表面CD34和CD44免疫组织化学染色呈阳性.慢病毒转染效率为90％以上,转染组中GFAP-,NSE-,NF-和巢蛋白mRNA和蛋白的表达量明显高于空白对照组和阴性对照组.结论 慢病毒介导TREM-2过表达载体转染促进骨髓间充质干细胞BMSCs向神经细胞转化,为中枢神经损伤和脊髓损伤的治疗提供种子细胞.
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