【摘 要】
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目的利用重组腺病毒载体携带短发夹RNA（shRNA），使难于转染的悬浮细胞达到较高的目的基因沉默效率。方法分别将含有人胎盘生长因子（PLGF）的干扰序列及阴性对照序列（scramble）连人pRNA
【机 构】
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辽宁中医药大学基础医学院卫生生物教研室,中国医科大学基础医学院发育生物教研室卫生部细胞生物学重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金(30600270)
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目的利用重组腺病毒载体携带短发夹RNA（shRNA），使难于转染的悬浮细胞达到较高的目的基因沉默效率。方法分别将含有人胎盘生长因子（PLGF）的干扰序列及阴性对照序列（scramble）连人pRNAT—H1．1／Adeno载体，获得重组穿梭质粒；将线性化的重组穿梭质粒与腺病毒骨架重组；将重组子转染HEK293细胞，经过3轮病毒包装，收获病毒颗粒并测定滴度。病毒颗粒感染悬浮细胞——人小细胞肺癌细胞（NCI-H250和NCI-H209），通过实时定量PCR方法鉴定靶基因沉默效应，并利用肿瘤细胞重建基质膜侵袭实
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