【摘 要】
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目的探讨K-ras第12密码子突变对K-ras蛋白自身活性及其下游信号通路的影响。方法选用本室已构建好的稳定高表达WT、G12A、G12C、G12D、G12R、G12S和G12V型K-ras蛋白的cos7同
【机 构】
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北京大学第五临床医学院（北京医院）、卫生部北京老年医学研究所,首都医科大学附属北京地坛医院检验科
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目的探讨K-ras第12密码子突变对K-ras蛋白自身活性及其下游信号通路的影响。方法选用本室已构建好的稳定高表达WT、G12A、G12C、G12D、G12R、G12S和G12V型K-ras蛋白的cos7同源细胞株作为研究对象，通过GST-Raf-1Ras结合域特异性结合Ras-GTP空间构象，免疫沉淀细胞内具有活性的K-ras蛋白，利用Westernblot技术检测沉淀下来的Ras-GTP水平并进行比较分析；通过Westernblot法检测K-ras下游信号通路中MER、ERK、ATK蛋白分子的磷酸化水
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