【摘 要】
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目的 通过研究神经细胞线粒体改变探索氟中毒致神经损伤的潜在生物学机制.方法 将SH-SY5Y细胞设置为对照组和20、40、60 mg/L NaF染毒剂量组,检测线粒体跨膜电位(ΔΨm)及线粒体内活性氧(MitoROS)水平,通过Western blot法检测线粒体动力学和自噬相关蛋白(Miro1、ATG5和PINK1)及凋亡相关蛋白(PARP、cleaved Caspase-3和Bcl-2)的表达情况,细胞免疫荧光法检测Miro1、ATG5和PINK1蛋白与线粒体共定位情况,流式细胞术检测细胞凋亡.结果
【机 构】
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华中科技大学同济医学院公共卫生学院 流行病与卫生统计学系,武汉 430030;华中科技大学同济医学院公共卫生学院 劳动卫生与环境卫生学系环境与健康教育部重点实验室,武汉 430030
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目的 通过研究神经细胞线粒体改变探索氟中毒致神经损伤的潜在生物学机制.方法 将SH-SY5Y细胞设置为对照组和20、40、60 mg/L NaF染毒剂量组,检测线粒体跨膜电位(ΔΨm)及线粒体内活性氧(MitoROS)水平,通过Western blot法检测线粒体动力学和自噬相关蛋白(Miro1、ATG5和PINK1)及凋亡相关蛋白(PARP、cleaved Caspase-3和Bcl-2)的表达情况,细胞免疫荧光法检测Miro1、ATG5和PINK1蛋白与线粒体共定位情况,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 随着NaF浓度增加,SH-SY5Y细胞 ΔΨm降低(P<0.01),MitoROS水平升高(P<0.05);线粒体转运蛋白Miro1表达升高(P<0.05),自噬相关蛋白ATG5(P<0.05)和PINK1(P<0.05)表达均升高;细胞早期凋亡率和总凋亡率均升高(均P<0.05),凋亡相关蛋白PARP(P<0.05)和cleaved Caspase-3(P<0.05)表达升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P<0.05).结论 高剂量氟可促进线粒体的氧化应激、转运和自噬,并诱导神经元凋亡.
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