体外斑点杂交筛选靶向多重耐药鲍曼不动杆菌高效反义核酸序列实验研究

来源 :中国抗生素杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenman1982
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目的 体外斑点杂交实验模拟体内环境验证计算机辅助软件设计的反义寡核苷酸序列的活性.方法 采用计算机辅助软件对多重耐药鲍曼不动杆菌生长必须基因gyrA的mRNA进行二级结构分析计算,设计出10条反义寡核苷酸序列,合成探针与体外转录并用地高辛标记的gyrA mRNA进行斑点杂交,分别选择一条杂交信号最强和一条杂交信号弱的探针序列合成连接穿膜肽序列的肽-肽核酸,以不同浓度的肽-肽核酸处理鲍曼不动杆菌标准株ATCC 19606和多重耐药株,测定经不同浓度PPNA处理的细菌光密度A600值并进行平板菌落计数,观察其
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