肿瘤导向肽介导荧光分子探针诊断膀胱肿瘤的临床前期研究

来源 :中华泌尿外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:muyanger280
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目的

研究膀胱肿瘤导向肽CSNRDARRC多肽序列与异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)制备的荧光分子,在体外内标记膀胱肿瘤细胞、肿瘤组织的光学分子影像学特征,为内镜光学分子影像诊断膀胱肿瘤的研究提供理论基础。

方法

固相合成法制备FITC-CSNRDARRC荧光分子探针,采用激光共聚焦显微镜显微成像技术、免疫荧光组织化学技术、活体光学分子荧光成像技术以及常规内镜摄像技术,分别在细胞、组织和活体水平,研究FITC-CSNRDARRC荧光分子探针标记膀胱肿瘤细胞的结合位点、影响结合率的因素、组织结合的特异性,及其活体体内器官分布和靶向性的研究。研究材料包括BIU-87膀胱肿瘤细胞株及其裸鼠移植瘤模型、人体膀胱肿瘤组织石蜡标本68例、人体腺性膀胱炎组织石蜡标本16例、人体肾透明细胞癌组织石蜡标本43例、人体胃腺癌石蜡标本68例以及膀胱肿瘤患者尿脱落细胞29例。

结果

FITC-CSNRDARRC荧光分子探针靶向结合于膀胱肿瘤细胞的细胞核,随着探针剂量的增加,细胞荧光强度也增加,探针与细胞的结合率与探针剂量线性相关。在组织水平探针与膀胱肿瘤组织的结合率为92.5%,与肾透明细胞癌组织、胃腺癌组织、腺性膀胱炎性组织的结合率分别为9.5%、8.8%和12.5%,其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱肿瘤的荧光强度分别为435.55±10.07、664.42±16.19、881.67±10.35,探针与膀胱肿瘤的结合率与肿瘤恶性程度成正比(P<0.05),离体和活体研究表明该探针能够与膀胱肿瘤组织靶向特异性结合。FITC-CSNRDARRC分子探针标记离体细胞时,激光共聚焦显微镜下细胞核为亮绿色斑点,石蜡组织标本和尿脱落细胞中的癌变细胞,使用荧光显微镜可根据亮绿色斑点影像识别,活体肿瘤组织的荧光分子影像采用常规内镜摄像系统不能摄取,必须使用高灵敏电子倍增成像设备。

结论

FITC-CSNRDARRC分子探针能够靶向特异性标记膀胱肿瘤细胞,标记位点位于细胞核,分子影像为亮绿色斑点。成像效果与成像系统的灵敏度密切相关,现有常规医学内镜摄像机不能呈现肿瘤光学分子影像。

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