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通过添加增效剂、正交试验设计优化PCR反应体系、联合采用多种PCR程序等措施,建立并优化了PCR扩增体系,成功地从高GC青枯菌基因组中扩增出了长度为2434bp且GC含量高达70.9Y00的aac基因。PCR反应体系为20pL包括5%DMSO、2.5mmol/LMgCl2、500/xmol/L dNTP、10pmol/L引物、1.25U Taq酶、50ng模板DNA。首先采用热启动PCR:95℃5min,保持80℃,加入Taq酶;然后采用二步PCR:5个循环包括变性95℃1min,65℃1min;最后采用