荷斯坦奶牛杀菌/通透性增加蛋白N端cDNA在大肠杆菌中的融合表达

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参照GenBank中安哥斯牛杀菌/通透性增加蛋白(BPI)序列,设计合成1对引物。应用RT-PCR技术,从荷斯坦奶牛嗜中性粒细胞mRNA中扩增出杀菌/通透性增加蛋白N端,将该序列与原核表达载体pGEX-4T-1连接,构建重组质粒pGEX-4T-1-BPI。重组质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),用IPTG诱导表达。结果表明,获得了BPIN端长度为714bp的cDNA序列,序列分析证实在第503位出现了点突变。重组质粒诱导表达后,经SDS-PAGE电泳检测重组蛋白约在52
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