fat-1转基因小鼠的构建与鉴定

来源 :青岛大学医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tiandiren100

【摘要】

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目的构建和鉴定携带有外源fat-1基因的转基因小鼠。方法将fat-1基因的cDNA与动物表达载体pEF—neo连接，构建pEF-fat-1重组质粒，酶切、测序鉴定正确后，以显微注射法把线性化重组

【作者】

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刘晓蕾侯琳蒋正尧葛银林

【机构】

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青岛大学医学院生理学教研室,青岛大学医学院生物化学与分子生物学教研室

【出处】

：

青岛大学医学院学报

【发表日期】

：

2007年1期

【关键词】

：

小鼠转基因 DNA 重组 fat-1基因 mice transgenic DNA recombinant fat-1 gene

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（30271217）

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目的构建和鉴定携带有外源fat-1基因的转基因小鼠。方法将fat-1基因的cDNA与动物表达载体pEF—neo连接，构建pEF-fat-1重组质粒，酶切、测序鉴定正确后，以显微注射法把线性化重组质粒注射到小鼠受精卵的雄原核中，并将受精卵移植到受体鼠的输卵管中产出转基因小鼠，通过PCR、Southern blot杂交等方法确立阳性整合有目的基因的G0代小鼠。结果成功构建了pEF-fat-1重组质粒，将其显微注射到小鼠受精卵中，得到G0代小鼠，PCR、Southern blot杂交确立了4只整合有fat-1基

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