m_3AChR-G_（11α）融合蛋白表达及功能检测

来源 :中国药理学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jay36890

【摘要】

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目的制备m3AChR-G11α融合蛋白,探索m3AChR与G11间的偶联功能、相互作用及其影响因素。方法通过应用两步PCR方法构建m3AChR-G11α融重组的cDNAs,并在Baculovirus-infected In

【作者】

：

白立川郭政东张雪薇孙科姜爱民

【机构】

：

中国医科大学药物毒理学教研室

【出处】

：

中国药理学通报

【发表日期】

：

2010年8期

【关键词】

：

M受体 G蛋白融合蛋白激动剂拮抗剂放射性配体 muscarinic acetylcholine receptors G-protein fusion p

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目的制备m3AChR-G11α融合蛋白,探索m3AChR与G11间的偶联功能、相互作用及其影响因素。方法通过应用两步PCR方法构建m3AChR-G11α融重组的cDNAs,并在Baculovirus-infected Insect cells（Sf9）细胞内表达m3AChR-G11α融合蛋白。BCA法测定Sf9细胞表达的膜蛋白总含量,[3H]QNB和[35S]GTPγS放射性配体结合实验检测融合蛋白的偶联功能。结果 BCA法测定Sf9细胞膜蛋白的总浓度为2.86g·L-1,M3-G11α融合蛋白

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