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目的
探讨载脂蛋白M(apoM)在胆固醇的摄取和外流中的作用。
方法以不同浓度NBD-胆固醇孵育Ana-1细胞,观察胆固醇浓度和孵育时间对Ana-1细胞摄取胆固醇的影响。利用腹腔巨噬细胞富集方法,采集不同基因型小鼠的腹腔巨噬细胞,观察胆固醇摄取的差异。10 μmol/L NBD-胆固醇孵育Ana-1细胞4 h后,分别用含或不含apoM的诱导外流液干预细胞。用荧光酶标仪检测荧光信号强度以反映胆固醇的摄取和外流。
结果在体外,Ana-1细胞对NBD-胆固醇的摄取在2.5~10 μmol/L的浓度范围内具有浓度依赖性。巨噬细胞对胆固醇的摄取在6 h达峰值,且达峰时间不受胆固醇孵育液浓度和巨噬细胞基因型的影响。6 h达平台期后,apoM/SR-BⅠ基因双敲除小鼠的腹腔巨噬细胞对胆固醇的摄取率明显低于SR-BⅠ基因敲除小鼠和apoM基因敲除小鼠(t=6.8、13.66,P<0.05)。在体外,apoM+HDL诱导组的胆固醇外流率明显大于apoM-HDL组(24.65%±0.93%对10.85%±0.64%,P=0.000 3)。与单独apoM-HDL组相比,加入apoM重组蛋白可抑制apoM-HDL组的胆固醇外流。
结论在体外,apoM参与了腹腔巨噬细胞对胆固醇的摄取,apoM能调节HDL介导的胆固醇外流。