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以肝素黄杆菌为研究对象,提出了一种将发酵分为生长和产酶两个阶段的生产肝素酶的新工艺.对培养基组成进行了优化,优化后组成(g/L):葡萄糖8,氯化铵4,磷酸二氢盐6,组氨酸0.75,甲硫氨酸0.75,氯化镁0.5;微量盐10-4mol/L.菌体生长和产酶两个阶段的最优温度为27℃和23℃,pH为6.4和7.0.在诱导时加入10-4mol/L Ba2+可以较好地消除SO42-的阻遏作用.采用优化工艺,摇瓶产酶比原来提高了66%.