小鼠胚胎成纤维细胞差异表达基因的筛选

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应用微阵列杂交法对培养前、后的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)mRNA进行检测,找到24类差异表达的基因,为进一步筛选MEF可能表达的新基因,对培养前(driver)、后(tester)的MEF mRNA进行抑制性消减杂交,产物与pGEM-T载体连接构建cDNA消减文库并转染JM109大肠杆菌.随机挑取阳性克隆,PCR扩增后对所得的差异表达基因进行测序及生物信息学分析.在随机挑取的145个克隆中,测得了128条EST序列,经生物信息学分析,它们代表了42类不同基因和3条新基因序列.结果表明,培养后MEF相对于
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